胞内劳森菌0710蛋白的表达及免疫活性分析

作者：张昆; 杨顺利; 许笑; 熊铃; 曲自刚; 汪靖; 蔡建平^*

来源：中国兽医科学, 2021, 51(09): 1148-1154.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2021.0137

• 胞内劳森菌
• 重组LI0710蛋白
• 原核表达
• 免疫活性

为了评价胞内劳森菌(Lawsonia intracellularis)鞭毛相关蛋白LI0710的免疫原性,将LI0710基因插入到pET-32a(+)原核表达载体,构建重组表达质粒pET-32a-LI0710,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导目的蛋白表达,获得重组目的蛋白(rLI0710),通过Western-blot验证rLI0710的反应原性,同时用rLI0710免疫新西兰大白兔,获得多克隆抗体,用间接ELISA和间接免疫荧光(IFA)方法验证rLI0710的免疫原性。结果显示,重组LI0710蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式表达;Western-blot揭示rLI-0710能够与LI试验感染小鼠血清反应,表明rLI0710具有反应原性;ELISA检测表明,rLI0710能诱导家兔产生高效价抗体,且IFA分析表明此抗体能与培养细胞中的LI反应,证明rLI0710具有良好的反应原性和免疫原性。本试验为基于LI0710蛋白的猪增生性回肠炎免疫学诊断方法的建立奠定了基础。

• 单位
  江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 中国农业科学院兰州兽医研究所