摘要
目的探讨1型糖尿病患者外周血单个核细胞(PBMC)中CD4调节性T细胞(Treg)及其亚群频率和其表达Helios、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)分子的变化情况。方法选取2016年4月至2017年4月在南京医科大学第一附属医院内分泌科就诊的40例TIDM患者为研究对象(T1DM组),同期医院体检健康人群67名作为对照组、密度梯度离心法分离出PBMC。以CD25和FoxP3标记CD4 Tregs(FoxP3+CD25+),以CD45RA及FoxP3标记区分Treg细胞亚群(初始型nTreg,CD45RA+FoxP3+;激活型aTreg,CD45RA-FoxP3hi;分泌型sTreg,CD45RA-FoxP3+),并进一步标记Treg各亚群中Helios及CTLA-4分子,行多色流式细胞术检测。用双侧未配对t检验分析两组之间的差异情况。结果与健康对照组相比,1型糖尿病组PBMC中的总Treg细胞及其亚群(nTreg aTreg及sTreg)占CD4 T细胞的频率差异均无统计学意义(t=0.109 5~0.575 0,均P>0.05),并且两组间nTreg、aTreg及sTreg亚群占总Treg细胞的频率差异亦无统计学意义(t=0.143 8-0.272 3,均P>0.05),进一步研究发现,Helios分子在两组间Treg细胞及其亚群(nTreg、aTreg及sTreg)上表达无统计学差异(t=0.178 4-1.124 0,均P>0.05)。但1型糖尿病组总Treg及sTreg、nTreg细胞亚群CTLA-4分子的表达均显著减少,差异有统计学意义(t=2.662-3.435,均P<0.05),而该分子在aTreg亚群的表达差异无统计学意义(t=1.728,P=0.0887,P>0.05)。结论本研究人群中,1型糖尿病患者PBMC中CD4 Treg及其亚群未发现频率的显著变化,但sTreg及nTreg细胞亚群抑制性表型CTLA-4表达下调,这可能是导致1型糖尿病患者Treg细胞抑制功能下降的原因之一
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单位南京医科大学第一附属医院