淡豆豉中产γ-氨基丁酸微生物对产毒黄曲霉菌的拮抗作用和毒素合成关键基因mRNA表达的影响

作者：戴家齐; 贺婧; 朱晓蓝; 王立元; 龙凯; 周立分; 杨安金; 翁美芝^*; 谢小梅^*

来源：中草药, 2024, 55(05): 1510-1517.

• 淡豆豉
• γ-氨基丁酸
• 产毒黄曲霉菌
• 黄曲霉毒素
• 拮抗作用
• 高效拮抗菌
• 实时荧光定量PCR

目的 考察从淡豆豉Sojae Semen Praeparatum(SSP)炮制过程中分离的15株产γ-氨基丁酸微生物对产毒黄曲霉菌的拮抗能力并筛选出具有抑制产毒黄曲霉菌生长和降解黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)的高效拮抗菌，探究高效拮抗菌发酵产物对黄曲霉毒素（aflatoxins）合成关键基因m RNA表达量的影响。方法 运用平板对峙法与十字交叉法检测15株产γ-氨基丁酸微生物及其发酵产物对产毒黄曲霉标准株（简称：产毒标准株）生长的影响，超高效液相色谱-串联质谱法（ultra performance liquid chromatography mass spectrometry,UPLC-MS/MS）检测15株菌对AFB1的降解效果，考察其对产毒黄曲霉菌的拮抗能力并筛选出高效拮抗菌；针对高效拮抗菌发酵产物分别运用菌丝干重法检测其对产毒标准株菌丝生长的影响，实时荧光定量PCR(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测其对黄曲霉毒素合成关键基因（aflR、aflD、aflM、aflP）m RNA表达的影响。结果 15株菌及其发酵产物对产毒标准株的生长抑制率分别在15.88%～56.05%和25.74%～52.12%，对AFB1降解率在2.74%～57.87%，表明它们对产毒黄曲霉菌均有一定的拮抗作用，并筛选出具有高效拮抗作用的黑曲霉菌Aspergillus niger(JC2)和枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis(Xd1)。当高效拮抗菌发酵产物加入量为2 000μL时，JC2和Xd1对产毒标准株菌丝生长的抑制率分别为73.82%和63.34%，且能明显抑制黄曲霉毒素合成关键基因aflR、aflD、aflM、aflP的m RNA表达。结论 淡豆豉炮制中存在既能产γ-氨基丁酸又能明显抑制产毒标准株生长和产毒的拮抗菌，其拮抗作用可能通过抑制产毒标准株菌丝生长和毒素合成关键基因的m RNA表达。

• 单位
  江西中医药大学附属医院; 南昌大学转化医学研究院; 江西中医药大学