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摘要
利用PCR技术扩增草莓轻型黄边病毒(strawberry mild yellow edge virus, SMYEV)中国分离物的外壳蛋白(coat protein, CP)基因，将SMYEV CP基因克隆至原核表达载体pET-32a,重组质粒pET-cp转化大肠杆菌BL21菌株，37℃振荡培养，1 mmol·L-1 IPTG诱导表达，检测发现CP融合蛋白大量存在于细胞裂解上清液中。Ni2+-NTA亲和树脂纯化CP融合蛋白，Western blot可检测到较单一的特异性条带，分子量约为46 kDa。用纯化的CP融合蛋白免疫家兔获得多抗血清，间接ELISA法测定抗血清效价达1∶512 000。以此多抗血清建立了Dot-ELISA和胶体金试纸条检测方法，不仅可以检测感染SMYEV的草莓样本，用于感病草莓的早期诊断和鉴定，还可以用于SMYEV CP蛋白的瞬时表达和系统表达等分析。
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