摘要

目的:探讨益肾疏肝汤含药血清对雷公藤多苷干预的大鼠颗粒细胞凋亡的影响及其可能的作用机制。方法:分离大鼠卵巢颗粒细胞,使用不同含量的肾疏肝汤含药血清以及不同浓度的雷公藤多苷含药血清处理细胞48 h后,使用CCK-8法检测细胞存活率,筛选益肾疏肝汤含药血清和雷公藤多苷含药血清剂量。并将细胞分为正常组(正常培养的细胞)、损伤组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组、阳性对照组(雌二醇)。分别采用CCK-8法、TUNEL法、蛋白质印迹法检测细胞增殖、细胞凋亡、凋亡及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白表达。结果:与正常组比较,损伤组细胞增殖、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达均显著受到抑制(P<0.05),而细胞凋亡率、B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)、裂解胱天蛋白酶-3(cl-caspase-3)蛋白水平均显著增加(P<0.05);与损伤组比较,阳性对照组及中药低、中药中剂量组、中药高剂量组细胞增殖、Bcl-2、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达水平均显著增加(P<0.05),而细胞凋亡率、Bax、cl-caspase-3蛋白水平均显著抑制(P<0.05);且中药组呈剂量依赖。结论:益肾疏肝汤含药血清可能通过激活PI3K/AKT/mTOR通路,抑制卵巢颗粒细胞凋亡。

  • 单位
    北京中医药大学东方医院; 北京中医医院; 中国中医科学院望京医院; 首都医科大学