逆转录酶基因过表达或沉默对HL-1细胞钠电流的作用

作者:但晴; 陈雅婷; 庄文娟; 刘传斌; 白婧; 董颖; 林琨*; 李泱*
来源:中国心脏起搏与心电生理杂志, 2023, 37(01): 36-42.
DOI:10.13333/j.cnki.cjcpe.2023.01.007

摘要

目的 研究逆转录酶(TERT)基因过表达或沉默对HL-1细胞钠电流(INa)的作用。方法 构建TERT基因过表达或沉默慢病毒载体,感染HL-1细胞,分为过表达慢病毒载体(TERT)组、对照载体(Vector)组、TERT RNA干扰慢病毒载体(shTERT)组、对照载体(shNC)组。应用定量荧光原位杂交(Q-Fish)方法测定端粒长度,应用CCK-8法绘制细胞生长曲线,应用全细胞膜片钳技术记录INa。结果 TERT组HL-1细胞端粒长度明显延长,从3.33±1.01延长至4.03±0.94(n=5,P<0.01),且增殖能力明显增强;-35 mV去极化时,与Vector组比较,TERT组HL-1细胞INa电流密度从(-149.5±12.6) pA/pF增至(-213.3±17.2) pA/pF(n=10,P<0.01)。而与shNC组比较,shTERT组INa电流密度从(-141.3±13.5) pA/pF降至(-87.3±9.8) pA/pF(n=10,P<0.01)。TERT组钠通道稳态失活曲线右移,通道关闭态失活时间延长,失活后恢复加速,shTERT组的效应恰好相反。而TERT组、shTERT组钠通道稳态激活和中间态失活变化不大。结论 TERT基因对HL-1细胞INa有明显的调控作用,这可能是其改变心房肌细胞电生理的机制之一。

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