microRNA-1在低切应力诱导血管平滑肌细胞增殖中的作用

作者：王聪聪; 徐忠伟; 李霞^*

来源：武警后勤学院学报(医学版), 2018, 27(03): 190-194.

DOI：10.16548/j.2095-3720.2018.03.003

• 低切应力
• 血管平滑肌细胞
• MicroRNA-1
• 锌指转录因子4
• 增殖

【目的】研究micro RNA-1(miR-1)参与切应力条件下ECs(endothelial cells,ECs)对VSMCs(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖活性调控的力学生物学反应机理,将有利于进一步探索动脉粥样硬化等心血管疾病的发病机制。【方法】应用细胞联合培养平行平板流动腔系统对与VSMCs联合培养的ECs施加15 dyn/cm2的正常切应力(normal shear stress,NSS)和5 dyn/cm2的低切应力(low shear stress,Low SS),加载时间为12 h;Western blotting检测联合培养VSMCs的细胞核增殖抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达变化;实时荧光定量PCR检测联合培养VSMCs的miR-1表达变化;通过Target Scan、miRWalk等网站预测miR-1的目标蛋白;Western blotting检测联合培养VSMCs的miR-1靶蛋白锌指转录因子4(kruppel-like factor 4,Klf4)的表达;通过转染技术,上调和抑制VSMCs的miR-1表达,Western blotting技术检测靶蛋白Klf4和PCNA的表达变化,以此验证miR-1对Klf4的负调控作用。【结果】与NSS相比,Low SS促进联合培养VSMCs的PCNA表达并显著抑制miR-1表达;Target Scan、miRWalk等网站预测miR-1的下游靶蛋白为Klf4;与NSS相比,Low SS明显上调联合培养VSMCs的miR-1靶蛋白Klf4的表达;静态条件下上调VSMCs的miR-1表达,靶蛋白Klf4和PCNA表达均显著降低,抑制VSMCs的miR-1表达,靶蛋白Klf4和PCNA表达均明显升高。【结论】Low SS通过联合培养VSMCs的miR-1及靶蛋白Klf4,促进VSMCs的增殖。

• 单位
  上海交通大学; 生命科学技术学院; 武警后勤学院