摘要
目的探究miR-145靶向调控Krüppel样因子4(KLF4)参与人骨髓间充质干细胞(BMSCs)向血管平滑肌细胞(VSMC)分化的机制。方法将人BMSCs细胞分为阴性对照组、miR-145组、miR-145+KLF4组和KLF4组。miR-145组转染miR-145类似物以过表达miR-145;KLF4组转染KLF4 pcDNA;miR-145+KLF4组同时转染miR-145类似物和KLF4 pcDNA。培养48 h后,用实时荧光定量聚合酶链反应法检测KLF4 mRNA和miR-145的表达水平,用免疫荧光染色检测SMα-actin和SM calponin蛋白的表达水平。结果培养48 h后,阴性对照组、miR-145组、KLF4组和miR-145+KLF4组的miR-145表达量分别为1.49±0.12,5.76±0.24,1.54±0.15和5.68±0.25,KLF4 mRNA表达量分别为2.51±0.13,0.81±0.04,8.63±0.30和3.51±0.16,SMα-actin蛋白相对表达量分别为2.18±0.17,0.97±0.08,6.55±0.28和2.93±0.22,SM calponin蛋白相对表达量分别为1.22±0.13,0.56±0.04,3.91±0.25和1.93±0.10。miR-145组的上述指标与阴性对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论在BMSCs中过表达miR-145会通过靶向KLF4,进而抑制SMα-actin和SM calponin蛋白的表达,从而抑制BMSCs向VSMC转化。
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单位遵义市第一人民医院; 贵州省人民医院