大鼠肝细胞热适应差异表达基因消减文库的构建与鉴定

作者：肖军; 邹飞; 蔡绍曦; 金玥

来源：中国病理生理杂志, 2004, (06): 173-176.

• 热适应
• 基因
• 抑制性消减杂交
• 大鼠

目的 :构建大鼠肝细胞热适应差异表达基因消减文库。方法 :实验采用热适应大鼠模型、常温对照。提取肝组织mRNA ,反转录cDNA并酶切、接头连接后分别以其中一组cDNA片段为tester,另一组为driver进行抑制性消减杂交 (SSH)构建消减文库。PCR扩增文库和未消减对照样品中的G3PDH基因以对比评估文库特异性。初步分离、筛选以评估文库的可靠性。结果 :PCR证实文库中G3PDH丰度大幅低于对照组 ,说明文库特异性较高。从文库中分离获得 30 0个目的基因片段 ,其中 2 7个经鉴定为差异表达基因 ,证实文库高效可靠。结论 :通过构建优质的热适应差异表达基因消减文库 ,为深入研究热适应机理奠定了基础

• 单位
  南方医科大学; 第一军医大学南方医院