检测6种常见儿童化脓性脑膜炎病原菌的PCR阵列方法的建立与评价

作者：赵成娜; 张超; 郑玉玲; 刘鹏; 姜永强

来源：军事医学, 2017, 41(11): 902-905.

• 化脓性脑膜炎病原菌
• PCR阵列
• 实时荧光定量PCR
• 脑脊液

目的建立同时检测肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,SP)、大肠杆菌(Escherichia coli,EC)、流感嗜血杆菌B型(Haemophilus influenzae type B,HIB)、脑膜炎奈瑟球菌(Neisseria meningitidis,NM)、无乳链球菌(Streptococcus agalactiae,GBS)、单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)6种常见儿童化脓性脑膜炎病原菌的PCR阵列方法,为快速检测临床常见的化脓性脑膜炎病原菌提供新技术。方法用6种病原菌核酸评价PCR阵列方法的扩增效率,最低检出限(LOD)及各病原引物探针之间是否存在交叉反应;利用模拟脑脊液样本评价PCR阵列方法的灵敏度与特异性,并收集临床脑脊液样本考察PCR阵列方法与临床脑脊液培养金标准方法的一致性。结果PCR阵列中各病原菌的引物探针特异性良好,无交叉反应,LOD可达10 cfu/ml。在模拟样本的评价中,PCR阵列方法灵敏度与特异性均可达到95%,且与临床金标准方法有较好的一致性。结论 PCR阵列方法可实现2.5 h内对6种常见儿童化脓性脑膜炎病原菌的同时检测,且灵敏度和特异性高,可为临床儿童化脓性脑膜炎病原学诊断提供参考。

• 单位
  安徽医科大学; 病原微生物生物安全国家重点实验室