5-Aza-CdR联合EBNA1-DC疫苗诱导的淋巴细胞对鼻咽癌C666-1细胞的杀伤作用

作者：谢云青; 黄丽洁; 林晓为; 陈莉; 陈珊珊^*

来源：中国肿瘤生物治疗杂志, 2023, 30(08): 701-706.

• EB病毒核抗原1
• 甲基化抑制剂
• 5-Aza-Cd R
• Epstein Barr病毒
• DC疫苗
• 鼻咽癌

目的：探讨EB病毒核抗原1(EBNA1) m RNA修饰的DC(EBNA1-DC)诱导的淋巴细胞联合甲基化抑制剂5-Aza-Cd R对鼻咽癌C666-1细胞的杀伤作用。方法：以构建的EBNA1-p CDNA3.1质粒为模板，体外转录获得EBNA1 m RNA，通过脂质体转染至健康人外周血来源DC，构建EBNA1-DC疫苗。流式细胞术检测转染后DC表型及5-Aza-Cd R处理后的C666-1细胞凋亡情况。实时无标记动态细胞分析技术检测EBNA1-DC疫苗诱导的淋巴细胞联合5-Aza-Cd R的特异性抗肿瘤活性。结果：转染EBNA1 m RNA后EBNA1-DC表面EBNA1阳性率为（59.3±5.85）%,HLA-DR的表达与未转染DC相比显著升高[（84.9±5.5）%vs(68.0±5.8)%,P=0.026],CD80的表达也显著升高[（88.2±3.9）%vs (61.1±4.4)%,P=0.015]。低剂量5-Aza-Cd R处理后的C666-1细胞凋亡情况与未处理的细胞相比无显著差异。经低浓度5-Aza-Cd R预处理的C666-1细胞中IRF7基因表达与未处理的细胞相比显著升高（P=0.000 1）。与空载的DC相比，EBNA1-DC诱导的淋巴细胞对EBV阳性表达的C666-1细胞具有更强的特异性杀伤活性（P=0.049）；经低浓度5-Aza-Cd R预处理的C666-1细胞对EBNA1-DC诱导的特异性免疫杀伤更敏感（P=0.019）。结论：5-Aza-Cd R与EBNA1-DC疫苗联合可显著增强对C666-1细胞的特异性免疫杀伤，本研究为开拓以m RNA为基础的DC疫苗及其在临床综合治疗中的应用转化提供前期研究基础。

• 单位
  福建医科大学; 福建省肿瘤医院