不完全溶血表型金黄色葡萄球菌溶血素及毒力等相关基因的研究

作者：郑毅; 谢小芳; 杜鸿; 张海方; 朱雪明; 王敏; 杨欢; 李爱青; 姜晔; 周惠琴

来源：中华临床感染病杂志, 2016, 9(03): 236-242.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1674-2397.2016.03.006

• 金黄色葡萄球菌
• 不完全溶血
• 溶血素
• 耐药
• 毒力

目的对不完全溶血表型的金黄色葡萄球菌(金葡菌)的溶血素及毒力基因进行分析,研究该类金葡菌的生物学特点。方法连续收集2013年至2014年苏州大学附属第二医院住院患者各类样本分离的不完全溶血表型金葡菌50株,选取同期住院患者样本分离得到的完全溶血表型金葡菌作为对照,接种于四种不同商品化绵羊血琼脂平板培养,比较溶血表型。采用实时荧光定量PCR技术分析标准菌株、完全和不完全溶血金葡菌四种溶血素基因(hla、hlb、hlc和hld)mRNA的表达,采用2-△△Ct法计算其相对表达量,使用t检验比较各菌株溶血素基因mRNA相对表达量的差异。采用免疫印迹技术分析α溶血素的表达。应用微量肉汤稀释法检测不完全溶血表型金葡菌的耐药特性;运用PCR技术检测mecA、pvl和tst基因的携带情况。结果 50株不完全溶血金葡菌在不同商品化血琼脂平板上均出现可稳定遗传的不完全溶血现象。以标准菌株四种溶血素mRNA表达量为1,不完全溶血表型菌株α、β、γ、δ溶血素hla、hlb、hlc和hld mRNA的相对表达量分别为0.02、7.51、0.06和0.12,二者相比差异具有统计学意义(t=8.46,-56.40,8.12和7.61,P值均<0.05),且α溶血素的表达量降低。药敏结果显示,50株不完全溶血表型菌株均为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),仅3株传代后使替考拉宁和利奈唑胺的最低抑菌浓度发生改变,但均未影响药敏结果的判断。mecA、pvl和如t基因在不完全溶血表型金葡菌中均呈阳性。结论不完全溶血表型金葡菌是一类β溶血素高表达而α、γ、δ溶血素表达量下降的MRSA,该类金葡菌携带毒力基因pvl和tst,提示其潜在的毒力较强,应引起临床重视。

• 单位
  苏州大学; 苏州大学附属第二医院