微小RNA-138靶向调控EZH2表达及对甲状腺癌细胞侵袭迁移的影响

作者：阳飞良; 彭琼; 荣玲

来源：临床肿瘤学杂志, 2019, 24(11): 967-972.

• 甲状腺癌
• 微小RNA-138
• 侵袭迁移
• Zeste同源增强子2

目的探讨微小RNA-138(miR-138)对zeste同源增强子2(EZH2)的靶向调控作用及甲状腺癌细胞8505C侵袭迁移的影响。方法 miRpathway在线分析miR-138在甲状腺癌组织中的表达及调控的生物学过程;脂质体法向8505C细胞转染miR-138模拟物(过表达组)或阴性对照序列(NC组)并设未转染的细胞为对照组,采用实时定量PCR(QPCR)检测miR-138水平,活细胞计数CCK-8试剂盒检测增殖情况,划痕实验和Transwell小室实验分别检测划痕愈合率和穿膜细胞数,QPCR检测EZH2、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、Janus激酶1(JAK1)和信号转导和转录激活因子3(STAT3)的mRNA水平,Western blotting检测EZH2、MMP-9、JAK1、磷酸化JAK1(p-JAK1)、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)和MMP-9的蛋白水平;双荧光素酶报告基因实验验证miR-138对EZH2的靶向调控作用。结果 miRpathway在线分析发现miR-138在甲状腺癌中调控多个生物学过程,且在甲状腺癌组织中的表达低于正常组织(P<0.05)。过表达组的miR-138水平为12.657±2.263,高于对照组的1.025±0.087和NC组的1.109±0.097(P<0.05);与对照组和NC组相比,过表达组转染24、48 h的细胞增殖活力降低(P<0.05)。过表达组的划痕愈合率和穿膜细胞数目分别为(22.571±2.168)%和(152.3±16.5)个,低于对照组的(59.424±3.624)%和(287.4±17.5)个及NC组的(61.280±4.035)%和(278.5±16.3)个(P<0.05);miR-138模拟物对EZH2野生型3’端非翻译区的荧光素酶活性有抑制作用(P<0.05),但对突变型无影响(P>0.05)。与其余两组相比,过表达组的MMP-9、EZH2、p-JAK1和p-STAT3水平降低(P<0.05),而JAK1和STAT3水平的差异无统计学意义(P>0.05)。对照组和NC组上述指标的差异无统计学意义(P>0.05)。结论 miR-138在甲状腺癌组织中低表达,且该miRNA在甲状腺癌中发挥抑制增殖和侵袭迁移的抑癌作用,可能与靶向调控EZH2和JAK1/STAT3/MMP-9通路有关,有作为甲状腺癌治疗候选靶点的潜能。

• 单位
  萍乡市第二人民医院