2型登革病毒对原代人肝窦内皮细胞凋亡、自噬以及相关基因表达的影响

作者：戴雪婷; 左丽^*; 赵军; 袁静; 裴华; 孔维莹

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2016, 36(05): 340-345.

• 登革病毒
• 原代人肝窦内皮细胞
• 凋亡
• 自噬
• Beclin-1
• ICAM-1

目的研究2型登革病毒(DENV-2)感染原代人肝窦内皮细胞(HHSECs)后, HHSECs的凋亡、自噬, 细胞间黏附分子-1(ICAM-1)及Beclin-1 mRNA水平的表达, 分析DENV-2致病过程中可能的作用机制。方法用DENV-2(MOI=1)作用于HHSECs, Real-time PCR动态检测DENV-2 NS1部分序列;CCK-8法动态检测DENV-2对HHSECs的毒性作用。real-time PCR动态检测被感染HHSECs的ICAM-1、Beclin-1 mRNA的表达水平。流式细胞术检测被感染HHSECs的细胞凋亡率, 以及LC3B和ICAM-1的表达。结果被DENV-2作用后的HHSECs有NS1部分基因序列的表达。DENV-2感染细胞后, CCK-8法检测细胞的抑制率分别为(10.90±1.24)%(12 h)、(16.40±0.42)%(24 h)、(17.00±0.46)%(36 h)、(29.60±0.26)%(48 h)。Real-time PCR检测HHSECs中Beclin-1及ICAM-1 mRNA的表达, 以未感染组为对照, 2-△△Ct值于24 h达峰值, 分别为46.77±2.55和40.97±4.91。流式细胞术动态观察被DENV-2感染的HHSECs的凋亡, 于12 h较明显, 凋亡率为13.17%;36 h时LC3B的表达率(35.50%)达到峰值;ICAM-1的表达率分别为9.17%(12 h)、14.7%(24 h)、12.7%(36 h)、11.6%(48 h)。结论 HHSECs对DENV-2易感。DENV-2可激活HHSECs, 诱导ICAM-1上调;可促进自噬的发生, 于早期诱导HHSECs细胞凋亡。

• 单位
  贵州医科大学