刺槐Kuntiz型胰蛋白酶抑制剂基因(RpKTI)的克隆及表达分析

作者：张晓静; 董启迪; 王霞; 张晓娜^*; 周建^*

来源：山东农业科学, 2022, 54(06): 10-19.

DOI：10.14083/j.issn.1001-4942.2022.06.002

• 刺槐
• RpKTI基因
• 基因克隆
• 生物信息学分析
• 表达分析

为了解刺槐(Robinia pseudoacacia)Kuntiz型胰蛋白酶抑制剂基因(RpKTI)的功能，本试验提取刺槐叶片中RNA,采用RACE PCR技术克隆RpKTI基因序列全长，并对其进行生物信息学分析及表达分析。结果表明，RpKTI基因的开放阅读框(ORF)长度为633 bp,共编码210个氨基酸，分子式为C1039H1586N258O307S5,是一个稳定的酸性疏水蛋白；在氨基酸序列的N端存在一个跨膜区，且在此跨膜区内含有信号肽；具有11个磷酸化位点及1个N-糖基化位点；二、三级结构均以延伸链及无规则卷曲为主。同源性及进化树分析表明，RpKTI基因属于STI超级家族，与蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)的KTI基因亲缘关系更近。通过实时荧光定量(qRT-PCR)分析发现RpKTI基因在铅镉混合胁迫3 d时，叶中的表达量最高，推测此基因可能在重金属铅镉胁迫下发挥重要作用。本研究为后期RpKTI基因的功能验证及应用研究奠定了理论基础。

• 单位
  河南科技学院