利用大肠杆菌表达系统制备抗VEGF螺旋-环-螺旋多肽及其纯化的研究

作者：庹有朋; 王刚^*; 叶正茂; 藤井郁雄; 万玉军; 罗丽娟; 李楠臻; 岳晓敏

来源：基因组学与应用生物学, 2021, 40(01): 224-229.

DOI：10.13417/j.gab.040.000224

• 抗VEGF多肽
• 大肠杆菌表达系统
• 多肽纯化

VEGF (血管内皮生长因子)是一种诱导肿瘤血管形成的作用最强、特异性最高的血管生长因子。本实验利用抗VEGF螺旋-环-螺旋多肽的基因M49,通过PCR技术扩增获得目的基因,构建原核表达pET-32a(+),转入大肠杆菌(Escherichia coli) BL21进行表达,并对目的蛋白进行诱导表达及纯化。结果表明PCR扩增得到186 bp基因片段,诱导表达后得到一个约为22 kD融合蛋白,并进一步使用SUMO蛋白酶切除标签,得到约3.5 kD目的蛋白,通过小鼠(Mus musculus)给药实验验证了目的蛋白的功能性。这将为下一步VEGF螺旋-环-螺旋多肽靶向药的研制提供了必要的条件。