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摘要
目的 探讨YAP蛋白对神经肌肉接头的影响及其机制。方法 以质粒为模板构建YAP敲低的shRNA,用Western Blot方法检测shYAP的敲低效率，并在此基础上将shYAP包进AAV8并感染C2C12肌管，通过免疫荧光染色检测乙酰胆碱受体的长度和荧光强度。将agrin加入至分化成熟的C2C12肌管中，通过免疫荧光染色检测加入agrin后细胞核中YAP的表达情况和乙酰胆碱受体聚集情况。采用Western Blot方法检验样本在agrin处理后YAP磷酸化的合成水平和YAP结合β-环联蛋白的生成体量。结果 YAP shRNA构建成功；肌管形成后敲低YAP能抑制乙酰胆碱受体聚集；agrin能促进C2C12肌管中的YAP进入细胞核；agrin能减弱YAP蛋白S127位的磷酸化。结论 YAP作为agrin下游信号分子调节神经肌肉接头形成。
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单位神经内科; 哈尔滨医科大学附属第四医院
