携带Decorin基因的质粒DNA构建及其对兔耳增生性瘢痕的治疗作用

作者：**丽; 王艳香; 杜丽^*; 卢育新; 吴家兵; 程晓晨; 潘自强; 赵希荣^*; 张庆林

来源：中华整形外科杂志, 2020, 36(10).

• 核心蛋白多糖
• 重组质粒
• 增生性瘢痕
• 转化生长因子-β1

目的探讨携带核心蛋白聚糖(decorin, DCN)基因的重组质粒对兔耳增生性瘢痕的治疗作用。方法将PCR扩增的人Decorin基因片段克隆到质粒载体pUDK上构建重组质粒pDCN, 并进行酶切和测序鉴定。重组质粒pDCN转染293T细胞, 并检测细胞内DCN及TGF-β1的表达。建立兔耳增生性瘢痕模型, 将12只新西兰大白兔采用随机数字表法分为PBS组、空质粒组、rhDCN组、pDCN低剂量(20 μg/cm2)组、pDCN中剂量(40 μg/cm2)组、pDCN高剂量(60 μg/cm2)组, 观察肥大指数、瘢痕组织病理改变及DCN表达等, 研究pDCN对兔耳增生性瘢痕的治疗作用。结果经过酶切、测序鉴定, Decorin基因片段成功插入质粒载体pUDK上, 重组质粒pDCN构建成功。pDCN转染至293T细胞后, DCN的RNA及蛋白表达水平均上调, TGF-β1表达受到抑制。应用不同剂量的pDCN实验性治疗兔耳增生性瘢痕, 结果显示pDCN中剂量组兔耳瘢痕的肥大指数(1.61±0.40)显著小于PBS组(2.07±0.55)(P<0.05), 而pDCN低剂量和高剂量组肥大指数均与PBS组没有显著差异。免疫组织化学结果显示, pDCN中剂量组中兔耳局部DCN表达显著高于PBS组(P<0.05);同时, 病理检测显示瘢痕组织中炎性细胞浸润明显减少, 纤维沉积减少, 表明中剂量pDCN可有效抑制兔耳增生性瘢痕的增生。结论携带Decorin基因的质粒pDCN通过抑制TGF-β1表达, 对兔耳增生性瘢痕有一定的治疗作用。

• 单位
  生命科学与食品工程学院; 淮阴工学院