重组酶介导等温核酸扩增技术检测伯氏疏螺旋体方法的建立

作者：马晓菁; 谢彩云; 刘丽娅; 叶锋; 谷文喜; 钟旗; 易新萍^*

来源：中国兽医杂志, 2021, 57(03): 77-79.

• 重组酶介导扩增
• 伯氏疏螺旋体
• 检测
• 莱姆病

本试验采用重组酶介导等温核酸扩增(RAA)技术建立伯氏疏螺旋体核酸的检测方法。根据伯氏疏螺旋体16S rRNA基因保守序列设计并合成特异性RAA引物,采用重组酶介导扩增技术电泳法,以10倍系列稀释1 ng/μL伯氏疏螺旋体B31基因组DNA为模板进行RAA,测定该方法的敏感性。通过对大肠杆菌、沙门菌、钩端螺旋体基因组DNA扩增验证该方法的特异性。结果显示,该方法对伯氏疏螺旋体标准株的B31基因组DNA检测限约为100 fg/μL,对大肠杆菌、沙门菌、钩端螺旋体均无扩增,具有良好的特异性。RAA具有特异性高、检测快速、灵敏等优点,本研究建立的伯氏疏螺旋体RAA检测方法,为伯氏疏螺旋体临床样本的快速诊断提供依据。

• 单位
  新疆畜牧科学院兽医研究所