摘要
目的 将p CMV-Tag2B-Flag标签连接到人线粒体溶质载体蛋白25A37(SLC25A37)的基因上构建真核表达载体,检测其对人肺癌细胞H460功能的影响。方法 采用PCR技术扩增人乳腺文库中SLC25A37的编码区片段,用限制性内切酶EcoR I和Xho I双酶作为该片段和Flag的载体,经连接后形成重组质粒。通过Western Blot(WB)技术鉴定目的基因在细胞中的表达,利用CCK-8和克隆形成方法检测SLC25A37对肺癌H460细胞增殖的影响,划痕试验检测SLC25A37对H460细胞迁移能力的影响。结果 将构建好的Flag-SLC25A37真核表达质粒转染H460细胞后成功表达融合蛋白;过表达SLC25A37后能够增强H460细胞的增殖和迁移能力。结论 携带Flag标签的人SLC25A37基因的真核表达载体能在人肺癌H460细胞中表达,该基因能够增强H460细胞的增殖和迁移能力。SLC25A37可能是促癌基因,并可能为肺癌的治疗提供重要的靶标。