上调lncRNA OIP5-AS1通过靶向miR-181d-5p减少脂多糖诱导的心肌细胞损伤

作者：陈健佳; 张小梅; 马文斌; 黄玉梅; 赵强^*

来源：山西医科大学学报, 2021, 52(05): 588-592.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2021.05.011

• OIP5-AS1
• miR-181d-5p
• 细胞活力
• 细胞凋亡

目的探讨长链非编码(long non-coding RNA,lncRNA) OIP5-AS1在脂多糖诱导心肌细胞损伤中的作用及内在机制。方法将大鼠原代心肌细胞分为两组,分别感染空载慢病毒(对照组)和载有OIP5-AS1序列的慢病毒(实验组),实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)验证感染效率。对照组和实验组细胞分别滴加100μl浓度为10μmol/L脂多糖诱导心肌细胞损伤,采用ELISA法检测培养基中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)的表达水平。采用CCK-8法和流式细胞术分别检测OIP5-AS1对大鼠原代心肌细胞的活力和凋亡的影响。生物信息学技术和双荧光素酶报告基因实验分别预测和验证OIP5-AS1的靶基因。qRT-PCR检测靶基因的表达。Western blot法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达。结果与对照组比较,实验组细胞中OIP5-AS1表达显著增加(P <0.01)。脂多糖处理后,与对照组相比,实验组培养基中TNF-α和IL-1β的表达明显降低(均P <0.05)。与对照组相比,实验组细胞活力明显增加(P <0.01),细胞的凋亡明显降低(P <0.01)。OIP5-AS1的靶基因可能是miR-181d-5p,OIP5-AS1可与miR-181d-5p互补配对(P <0.01)。与对照组相比,实验组细胞中miR-181d-5p的表达明显降低(P <0.01)。与对照组相比,实验组细胞中Bcl-2蛋白表达增加,Bax和Caspase-3蛋白表达降低。结论上调OIP5-AS1可通过靶向抑制miR-181d-5p表达,减少脂多糖诱导的心肌细胞损伤。

• 单位
  广州医科大学附属顺德医院