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摘要
目的肝癌衍生生长因子(HDGF)是近年来逐渐引起重视的一种细胞生长因子,在许多肿瘤细胞中高表达。本研究拟构建RNAi干扰慢病毒载体,沉默HDGF基因在大肠癌SW480细胞中的表达,观察细胞的增殖状态。方法RT-PCR方法检测HDGF基因在大肠癌中的表达。利用Invitrogen公司在线网站设计HDGF干扰序列,片段合成后构建慢病毒RNAi表达载体,随后利用293FT细胞将其包装成成熟慢病毒颗粒去感染SW480细胞,经Blasticidin抗性选择培养后,建立了稳定表达HDGFsiRNA的SW480细胞株。实时荧光定量PCR和Western Blot检测HDGF基因在mRNA和蛋白水平表达变化;...
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