饰胶蛋白聚糖对猪卵泡颗粒细胞表型和功能的影响

作者：杨菲菲; 杨飞; 孙义姗; 黄涛^*

来源：黑龙江畜牧兽医, 2021, (04): 35-42+153.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2020.04.0410

• 猪
• TGF-β信号通路
• 饰胶蛋白聚糖
• 颗粒细胞
• 干扰
• 过表达

为了研究转化生长因子-β(TGF-β)信号通路中的饰胶蛋白聚糖(decorin, DCN)基因对猪卵泡颗粒细胞的调控作用,试验构建DCN基因干扰和过表达载体,并将构建好的干扰和过表达重组质粒转染猪卵泡颗粒细胞,通过实时荧光定量PCR技术进行有效载体的筛选以及检测其对TGF-β信号通路下游基因(TGF-βRⅠ、TGF-βRⅡ、SMAD1、SMAD2、SMAD3、SMAD4、SMAD5)和细胞凋亡基因(Bax、Bcl-2)mRNA的表达水平影响,然后用MTT法和流式细胞仪检测DCN基因干扰和过表达对卵泡颗粒细胞增殖及凋亡的影响。结果表明:DCN干扰(pSIREN-DCN01、pSIREN-DCN02、pSIREN-DCN03)和过表达[pcDNA3.1(+)-DCN]载体构建成功,其中pSIREN-DCN01抑制DCN基因表达的效果最好,干扰效率最高。过表达DCN基因时,TGF-βRⅠ基因mRNA相对表达量下降,使得SMAD2、SMAD3基因mRNA相对表达量也下降,进而同时抑制卵巢颗粒细胞增殖和促进其凋亡;干扰DCN基因时,TGF-βRⅠ基因mRNA相对表达量显著上升(P<0.05),使得SMAD2、SMAD3基因mRNA相对表达量也上升(P<0.05),进而促进颗粒细胞增殖和凋亡。说明DCN基因可通过调节TGF-β信号通路促进猪卵泡颗粒细胞的凋亡,间接影响猪的繁殖性能。

• 单位
  动物科技学院; 石河子大学; 天康生物股份有限公司; 金华职业技术学院