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摘要
家畜相关耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(livestock-associated methicillin-resistant Staphylococcus aureus,LA-MRSA)在畜牧业和动物性食品中多次被检测到，可以向人群传播，造成严重的公共卫生问题，因此研究其耐药性、毒力因子的表达与调控对LA-MRSA的防治及后续药物的开发具有重要意义。本研究以宁夏规模化奶牛养殖场乳腺炎患牛牛乳中分离出的9株LA-MRSA为试验对象，通过抗菌药物敏感性、生物被膜形成能力检测和细菌体外侵袭力试验筛选出具有高耐药、高毒力特征的LA-MRSA菌株，结合本实验室前期LA-MRSA分子分型结果，鉴定出1株具有高毒力特征的代表菌株，然后将代表菌株和标准菌株ATCC 33591进行转录组测序(RNA-seq)分析，最后通过RT-qPCR验证RNA-seq结果准确性。高毒力LA-MRSA鉴定结果显示，9株LA-MRSA中编号为D10的菌株对13种抗菌药物耐药，且生物被膜形成能力、体外侵袭力较强，具有高耐药、高毒力特征。RNA-seq分析结果显示，与标准菌株相比，D10株存在大量差异表达基因(differential expression genes, DEGs),其中多种生物被膜形成相关基因、侵袭性毒素基因、与宿主免疫逃逸相关基因及编码甲氧西林抗性的mecA基因等过度表达。KEGG分析结果显示，DEGs共参与了84种不同代谢途径，主要在新陈代谢、次生代谢产物的生物合成、碳代谢、逆环境下的微生物代谢等通路大量聚集，但整体差异不显著。RT-qPCR结果显示，mecA、hld、thyA等重要基因的表达趋势与RNA-seq基本一致，表明RNA-seq结果良好，数据真实可靠。以上结果表明，本研究筛选的宁夏地区LA-MRSA流行株具有较高的毒力水平及较强的感染能力。
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