枯草芽孢杆菌B2-GFP菌株的构建及其在土壤中的定殖

作者：雷晶晶; 康业斌^*; 苗圃; 马君红; 石秋环

来源：福建农林大学学报（自然科学版）, 2022, 51(05): 577-582.

DOI：10.13323/j.cnki.j.fafu(nat.sci.).2022.05.001

• 枯草芽孢杆菌B2
• 绿色荧光蛋白
• 定殖
• 烟草
• 烟草疫霉

采用质粒消除与热激法构建枯草芽孢杆菌工程菌株B2-GFP,并测定其生长曲线、稳定性及对烟草疫霉的抑制率；同时，采用灌根和稀释平板法测定该菌株在烟株土壤中的活菌数.结果表明：工程菌株B2-GFP较野生型菌株B2提前1 h进入指数增长期，在培养11 h后同时进入稳定生长期；B2-GFP与烟草疫霉对峙培养后抑菌率达48.30%;在不含卡那霉素的LB固体培养基中继代培养10代后，在荧光显微镜下，菌落及菌体仍具有较强绿色荧光.烟株根际土壤活菌数大于根围土壤活菌数，且均呈现先升后降再趋于稳定的规律.在灭菌土壤中接种工程菌株B2-GFP第14天，烟株根际土壤活菌数达1.61×107 CFU·g-1;在自然土壤中接种该菌第42天，烟株根际土壤活菌数达1.46×107 CFU·g-1;接种第70天仍能保持绿色荧光表型.本研究证实工程菌株B2-GFP在烟田土壤中能够定殖并保持其特性.

• 单位
  园艺与植物保护学院; 河南科技大学; 河南省烟草公司洛阳市公司