实时PCR检测食品中荧光假单胞菌方法的建立

作者：闵可; 张政; 周雨蕾; 侯温甫; 王宏勋; 周敏^*

来源：食品科学, 2020, 41(24): 304-309.

• 荧光假单胞菌
• 实时聚合酶链式反应
• gyrB基因

针对荧光假单胞菌分子检测靶点gyrB基因设计引物和探针,制备标准质粒,绘制标准曲线,建立荧光假单胞菌实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)检测体系。特异性评价表明该体系能够特异性检测荧光假单胞菌,其他细菌均无检出。灵敏性检测结果表明纯DNA水平灵敏度可达14.3 fg/μL,纯培养物水平上检测灵敏度为3.0×102 CFU/mL。抗干扰性实验结果表明当加入低浓度背景干扰菌时,对上述体系检测灵敏度没有影响。人工污染样品检测表明适当增菌可检测到荧光假单胞菌,说明Taq Man探针real-time PCR法特异性强、灵敏度高、抗干扰性能力强。

• 单位
  武汉轻工大学