视网膜内质网应激免疫组织化学抗体浓度选择的实验研究

作者：陈小红; 梁婉娇; 黄诗舒; 孙晏; 罗欣; 赖璐; 池昭晟; 陈梅珠; 王云鹏^*; 严伟明^*

来源：国际眼科杂志, 2023, 23(01): 32-38.

• 视网膜色素变性
• 内质网应激
• 视网膜
• 小鼠
• 免疫组织化学染色

目的:探索小鼠视网膜色素变性(RP)模型视网膜内质网应激免疫组织化学(IHC)染色抗体的最适浓度，为研究RP发病机制及干预措施提供相应的指标检测方法。方法:给予清洁级健康雄性C57BL/6J小鼠腹腔注射N-甲基-N-亚硝基脲(MNU,60mg/kg)制备RP小鼠模型，造模后第7d行视网膜电图(ERG)检测和苏木精-伊红(HE)染色验证造模成功，摘取眼球并采用IHC染色法检测视网膜内质网应激相关蛋白(IRE1、ATF6、PERK、GRP78、Caspase-12)表达情况。结果:IRE1、ATF6、PERK、GRP78、Caspase-12蛋白均在RP小鼠视网膜呈阳性表达，IRE1抗体浓度为1∶1000、ATF6抗体浓度为1∶500和1∶1000(此抗体两种浓度阳性表达无差异，P>0.05)、PERK抗体浓度为1∶1500、GRP78抗体浓度为1∶200、Caspase-12抗体浓度为1∶100时，阳性表达强度适宜，且与各自其余抗体浓度相应蛋白阳性表达均有差异(P<0.05)。结论:内质网应激相关蛋白抗体浓度IRE1为1∶1000、ATF6为1∶500和1∶1000、PERK为1∶1500、GRP78为1∶200、Caspase-12为1∶100时，其在小鼠RP模型视网膜IHC染色阳性表达程度较适宜。

• 单位
  天津医科大学眼科医院; 福建医科大学; 福建省立医院; 福建省晋江市医院; 上海市第六人民医院; 厦门大学附属东方医院