胱天蛋白酶募集域蛋白9与小鼠缺血性脑损伤炎症反应的相关性研究

作者：丁建文; 曹春水; 熊华威; 李洋; 黄坚友; 黄亮^*

来源：中华急诊医学杂志, 2021, 30(02): 191-196.

• 胱天蛋白酶募集域蛋白9
• 缺血性脑损伤
• 炎症反应
• 核转录因子-κB
• 炎症因子
• 肿瘤坏死因子-ɑ
• 白细胞介素-1β
• 白细胞介素-6

目的研究缺血性脑损伤小鼠脑组织中胱天蛋白酶募集域蛋白9(caspase recruitment domain protein 9,CARD9)与炎症反应的关系。方法取24只SPF级BALB/c雄性小鼠随机(随机数字法)分成4组, 即假手术组、缺血3 h组、缺血6 h组、缺血12 h组, 每组6只。缺血组小鼠采用线栓栓塞法构建永久性大脑中动脉阻塞(permanant middle cerebral artery occlusion,pMCAO)模型, 各组于术后预定时间点处死小鼠。通过Western blot检测患侧脑组织中CARD9水平和NF-κB的活化, RT-PCR和ELISA分别检测患侧脑组织中炎症因子TNF-ɑ、IL-lβ、IL-6 mRNA及蛋白表达量。采用SPSS 21.0软件进行统计分析, 每两组间计量资料比较采用独立样本t检验, 采用Pearson相关分析比较CARD9与炎症因子之间的相关性。结果与假手术组相比, 缺血3 h、6 h和12 h组脑组织CARD9表达均增加[(0.325±0.011)vs (0.462±0.019),P=0.036; (0.735±0.036),P=0.003; (0.903±0.024),P=0.001];与假手术组相比, 缺血3 h、6 h和12 h组缺血脑组织NF-κB的活化均升高[(0.227±0.016 )vs (0.316±0.017),P=0.041;( 0.445±0.021),P=0.016; (0.671±0.039),P=0.008]。与假手术组相比, 缺血3 h、6 h和12 h组脑组织TNF-ɑ表达均增加[(0.53±0.06)vs (1.06±0.10),P=0.009; (1.47±0.15),P=0.004; (2.78±0.18),P=0.001];与假手术组相比, 缺血3 h、6 h和12 h组脑组织IL-lβ表达均增加[(0.55±0.07)vs (1.01±0.11),P=0.009; (2.13±0.16),P=0.003; (3.09±0.18),P=0.001];与假手术组相比, 缺血3 h、6 h和12 h组脑组织IL-6表达均增加[(1.99±0.18)vs (4.10±0.41),P=0.006; (8.54±0.84),P=0.002; (11.56±0.96),P=0.001]。Pearson相关分析显示CARD9与NF-κB活性、TNF-ɑ、IL-1β、IL-6均存在正相关(r=0.894,P=0.001;r=0.747,P=0.008;r=0.810,P=0.001,r=0.773,P=0.007)。结论小鼠缺血性脑损伤早期脑组织中CARD9与炎症反应存在正相关。

• 单位
  南昌大学第一附属医院