恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1 EGF2结构域的表达及免疫反应特点

作者：萨日娜; 张冬梅; 潘卫庆

来源：中国人兽共患病学报, 2007, 23(10): 982-984,992.

DOI：10.3969/j.issn.1002-2694.2007.10.007

• EGF-2
• MSP1-19
• 疟疾
• 毕氏酵母

目的 制备恶性疟原虫红内期抗原MSP1C-末端EGF2区域,用于分析该区域在自然感染条件下的免疫应答特点.方法 制备恶性疟原虫裂殖体表面蛋白1(MSP1)C-末端的EGF2片段,并将其与谷胱甘肽转移酶(GST)片段融合,通过电转化整合入毕氏酵母的基因组,进行诱导表达,纯化表达产物,并对其免疫特性进行初步分析.结果 初始对单个EGF2片段表达未成功,与GST片段融合后检测到表达,经过Ni柱浓缩纯化的诱导表达上清, 经SDS-PAGE分析在33kDa处出现表达的蛋白条带,经Western blot检测表明该蛋白为所需的目的蛋白;ELISA结果表明GST-EGF2重组蛋白能够与免疫兔血清反应,且平均抗体滴度可达5981.结论 利用毕氏酵母表达系统表达了EGF2结构域,并证明该蛋白能与特异抗体反应,可用于EGF2相关的疟疾保护性免疫的研究.