转染血管内皮生长因子基因骨髓间充质干细胞的体内分布及安全性

作者：花奇凯; 邝晓聪; 陈相宜; 蔡捷; 谭淇; 赵劲民

来源：中国组织工程研究, 2018, 1-5.

• 间充质干细胞
• 基因转染
• 血管内皮生长因子
• 安全性
• 干细胞

背景:将血管内皮生长因子基因转染至骨髓间充质细胞内是常见的成血管诱导模式,但该模式的临床应用安全性是目前关注热点之一。目的:构建体外转染血管内皮生长因子的人骨髓间充质干细胞系h-BMSCVEGF,进一步观察转染后细胞的生长状态与体内分布情况。方法:采用LipofectamineTM 2000脂质体转染、筛选和克隆培养出携带血管内皮生长因子的人骨髓间充质干细胞系h-BMSCVEGF,观察转染后的细胞形态改变。将h-BMSCVEGF接种于裸鼠腋窝皮下,观察接种部位成瘤情况;将0.2 m L h-BMSCVEGF细胞悬液经尾静脉注入裸鼠体内,移植4周后,苏木精-伊红染色观察心、肝、脾、肺、肾、肠和脑组织,RT-PCR检测心、肝、脾、肺、肾、肠和脑组织血管内皮生长因子基因的表达。结果与结论:（1）转染后,骨髓间充质干细胞由漩涡状生长转为细胞密集交错混杂生长,方向性不明显,细胞之间边界不清晰,细胞形态为梭形或多角形混杂,传至第15代开始出现衰老迹象;（2）皮下移植4,6周,裸鼠腋窝未见移植瘤出现;（3）细胞移植4周后,裸鼠一般状况尚好,苏木精-伊红染色显微镜观察裸鼠各脏器组织与细胞结构无显著异常及肿物生成,RT-PCR检测血管内皮生长因子基因在心、肝、脾、肺、肾、肠和脑均有表达;（4）结果表明,体外转染血管内皮生长因子的人骨髓间充质干细胞系在体内分布广,有一定存活期且无明显成瘤性,但移植安全性仍需进一步探讨。

• 单位
  广西医科大学; 基础医学院; 广西医科大学第一附属医院