多瘤病毒样颗粒的制备及血清学检测方法的建立

作者：赵洪兰; 刘熙君; 徐承富; 王岳; 江永珍; 宋敬东; 毕胜利

来源：疾病监测, 2013, 28(11): 936-939.

• 多瘤病毒
• 病毒样颗粒
• 酶联免疫吸附试验
• 血清学检测

目的制备多瘤病毒(John Cunningham virus,JCV)病毒样颗粒并建立JCV血清学检测方法,了解我国一般人群JCV流行情况。方法通过基因合成技术合成JCV衣壳蛋白基因VP1,将其克隆至PET-21a质粒,转化BL21(DE3)大肠埃希菌,IPTG诱导表达,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定目的蛋白表达。采用2次超速离心法对目的蛋白进行纯化,通过SDS-PAGE、透射电子显微镜及血凝试验鉴定纯化产物。以纯化产物为抗原建立间接酶联免疫吸附试验(ELISA)法,筛查一般人群血清标本,分析该人群JCV感染情况。结果通过透射电子显微镜观察及血凝试验鉴定,显示纯化产物具有和天然JCV颗粒类似的形态结构和血凝活性。以纯化的JCV病毒样颗粒为抗原建立了间接ELISA法,筛查了一般人群抗JCV IgG抗体,结果显示一般人群抗JCV IgG抗体阳性率为54.2%。结论本研究制备了JCV病毒样颗粒,所建立的ELISA法可应用于JCV人群血清流行病学调查。

• 单位
  粤北人民医院; 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所; 浙江大学医学院附属第一医院