STK15基因沉默导致胃癌细胞分裂停滞

作者：兰斌; 陈雪华; 刘炳亚; 瞿颖; 张晓青; 蔡劬; 戴起宝; **; 朱正纲

来源：中华病理学杂志, 2006, (02): 106-109.

• 胃肿瘤
• 细胞周期
• 有丝分裂
• RNA干扰

目的探讨丝氨酸/苏氨酸激酶15(serine/threoninekinase15,STK15)基因在胃癌细胞有丝分裂中的作用。方法应用RNA干扰技术(RNAi)抑制胃癌细胞株MKN45细胞STK15基因表达;realtime定量PCR及Westernblot检测干扰前后STK15mRNA及蛋白质表达的变化;倒置显微镜观察MKN45细胞形态的变化;流式细胞仪检测细胞周期的变化;MTT法检测细胞增殖速度的变化;免疫荧光结合激光共聚焦显微镜观察MKN45细胞微管及有丝分裂表型的改变。结果STK15基因沉默后,其mRNA及蛋白质表达明显下降,realtimePCR结果显示,转染后48h,STK15-组STK15mRNA水平较对照siRNA组的下降了89.54%;Westernblot灰度比半定量检测显示,STK15蛋白水平较对照siRNA组降低了57.18%。较多MKN45细胞呈圆形改变并呈现G2期细胞的DNA含量,STK15-组3个时间点的圆形细胞占18.95%,而对照siRNA组为8.34%,差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞仪检测结果显示,STK15-组G2期DNA含量细胞平均值为26.13%,而对照siRNA组G2期DNA含量细胞平均值12.46%(P<0.05)。细胞增殖速度减慢(P<0.05)。细胞有丝分裂表型发生改变(P<0.05)。结论STK15基因在MKN45细胞有丝分裂过程中可能起着关键作用,阻断其表达可导致MKN45细胞有丝分裂停滞。

• 单位
  神经内科; 福建医科大学附属第一医院; 福建医科大学附属协和医院