铁皮石斛及霍山石斛ISSR鉴定体系的建立与优化

作者：段媛媛; 卢超; 郭杰; 郭晓亮; 周武先; 游景茂^*

来源：分子植物育种, 2019, 17(13): 4360-4366.

DOI：10.13271/j.mpb.017.004360

• 铁皮石斛
• 霍山石斛
• ISSR
• 体系优化

采用均匀设计和单因素试验相结合的方法,探寻鉴定铁皮石斛及霍山石斛ISSR-PCR最佳的各组分(即引物, 2×Taq Master Mix,模板DNA)用量,为进一步利用ISSR分子标记鉴别铁皮石斛和霍山石斛提供理论依据。结果表明,ISSR-PCR最佳反应体系为:20μL的反应体系中含有2×Taq Master Mix 11.5μL,模板DNA 35 ng,引物0.4μmol/L。此外,筛选出6条多态性较好、条带稳定的引物(UBC826, UBC827, UBC834,UBC842, UBC849及UBC817),并对该反应体系进行了验证,结果表明,所选引物及最佳反应体系对铁皮石斛和霍山石斛的ISSR扩增稳定性强,可用于铁皮石斛和霍山石斛的鉴定。

• 单位
  湖北省农业科学院中药材研究所