慢病毒介导的siRNA对１型鸭肝炎病毒复制的抑制作用

作者：董亚青; 彭仪伟; 王永娟; 施鑫蕊

来源：中国动物传染病学报, 2021, 1-8.

DOI：10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.20210817.011

• 慢病毒
• 鸭肝炎病毒
• 抑制
• siRNA

为探索RNAi技术在鸭病毒性肝炎防控中的作用。本研究将筛选出的沉默RdRp效果较好的shRNA1、shRNA2和突变体shRNA-NC分别插入pPLK/GFP/+Puro载体，构建慢病毒载体pPLK-shRNA-RdRp-1、pPLK-shRNA-RdRp-2、pPLK-shRNA-NC，制备重组慢病毒Lenti-shRNA-RdRp-1、Lenti-shRNA-RdRp-2、Lenti-shRNA-NC；将重组慢病毒单独或者联合接种鸭胚成纤维细胞后感染DHAV-1，应用荧光定量PCR的方法检测感染DHAV-1的鸭胚成纤维细胞上RdRp基因的表达量及病毒TCID50来判断siRNA对病毒及病毒基因的抑制作用，并进一步将结果在鸭胚上进行检测。结果显示，Lenti-shRNA-RdRp-1、Lenti-shRNA-RdRp-2、Lenti-shRNA-RdRp-1+2均能较好的抑制RdRp基因的表达，病毒感染后72 h，三组的抑制效率均在95%以上，且在鸭胚中也能较好抑制DHAV-1的增殖，为鸭病毒性肝炎的防控提供了新思路和方向。

• 单位
  江苏农牧科技职业学院