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摘要
目的：基于天冬酰胺内肽酶（AEP）/磷酸酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B(PKB/AKT)，探讨温肾散结方（WSSJ方）对人前列腺癌细胞增殖和迁移能力的影响，并进一步探讨其潜在的分子机制。方法：制备WSSJ方冻干粉；体外培养人前列腺癌PC3、DU145和22RV1细胞，CCK-8法检测WSSJ方对前列腺癌细胞相对活力的影响并测定最佳给药浓度；集落形成实验检测WSSJ方对单细胞增殖能力的影响；划痕实验检测WSSJ方对前列腺癌细胞迁移能力的影响；RT-qPCR检测细胞内AEP mRNA、PI3K mRNA及AKT mRNA表达；Western blotting检测细胞内AEP、PI3K及AKT蛋白表达。结果：WSSJ方组前列腺癌细胞增殖活力随给药浓度升高逐渐降低；WSSJ方组细胞计数与细胞融合情况均低于对照组；WSSJ方低、中、高剂量组细胞集落形成数量均少于对照组；WSSJ方组细胞迁移率显著低于对照组（P<0.01）;WSSJ方组PC3细胞AKT蛋白相对表达量低于对照组，DU145细胞、22RV1细胞AEP、PI3K蛋白相对表达量均低于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05或P<0.01）;WSSJ方组PC3细胞、DU145细胞、22RV1细胞AEP mRNA、PI3K mRNA及AKT mRNA表达均显著低于对照组（P<0.05或P<0.01）。结论：WSSJ方能有效抑制人前列腺癌细胞的增殖和迁移能力，并且其对肿瘤细胞的抑制呈现剂量依赖性，作用机制可能与下调AEP抑制PI3K/AKT信号通路有关。
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单位上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院
