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摘要
microRNA395是高等植物保守的miRNA家族，主要通过靶向低亲和力硫酸盐转运蛋白（AST）和ATP磺酰化酶（APS）来响应植物的硫饥饿反应，硫饥饿会显著影响固氮植物的结瘤共生固氮过程。为解析miR395在豆科植物结瘤共生固氮中的作用，对红芸豆miR395家族成员进行生物信息学预测，并对pvu-miR395在红芸豆不同组织和根瘤菌侵染不同时间段进行差异表达分析。结果显示，在全基因组水平上鉴定出8个pvu-miR395的家族成员，位于第2、3号染色体上。pvu-miR395家族成员成熟序列和星标序列高度保守，它们的前体序列均可生成稳定的二级结构。进一步对芸豆与大豆、苜蓿、拟南芥、水稻miR395家族成员进行系统进化分析，可将miR395家族成员分为GroupⅠ～Ⅳ4个亚家族。顺式作用元件分析发现，该家族成员可能参与植物激素、胁迫、生长和发育等过程；qRT-PCR差异表达分析发现，pvu-miR395家族成员均在根瘤中表达量最高，具有组织特异性，且pvu-miR395的表达量随根瘤菌处理时间延长呈现先升高后降低的趋势，显著抑制根瘤菌的侵染。靶基因预测表明，硫酸盐转运蛋白和硫酸腺苷酰基转移酶可能是pvu-miR395的靶基因。
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