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摘要
目的 探讨同源域蛋白同源盒基因（HOPX）在胃癌中的表达情况及调控胃癌细胞的增殖能力及其作用机制。方法 采用Real time-PCR及Western blot检测HOPX在胃癌细胞和组织中的mRNA及蛋白表达水平；在胃癌细胞HGC27及BGC823中稳定过表达HOPX基因，通过CCK-8法、克隆形成实验、EdU法检测HOPX对胃癌细胞增殖的影响；采用流式细胞术检测HOPX对胃癌细胞细胞周期的调控作用。另外将用于检测β-catenin/TCF/LEF可转录活性的荧光素酶报告质粒TOP flash和FOP flash转染胃癌细胞，使用双荧光素酶报告系统测定过表达HOPX对细胞内荧光素酶转录活性的影响。此外采用Western blot分别测定过表达HOPX对胃癌细胞内β-catenin、GSK-3β及p-GSK-3β蛋白表达水平的变化。进一步检测过表达HOPX后，胃癌细胞核内β-catenin蛋白表达水平及其下游靶基因CyclinD1的表达变化，以探讨HOPX影响胃癌细胞增殖的具体机制。结果 Real time-PCR及Western blot结果显示HOPX在胃癌中的m RNA及蛋白表达水平均显著降低，HOPX过表达后可显著抑制胃癌细胞的增殖并抑制其细胞周期。Western blot结果表明过表达HOPX可通过抑制GSK3β的磷酸化水平促进β-catenin的降解，从而抑制β-catenin入核，进而下调下游靶基因CyclinD1的表达，达到抑制胃癌细胞的增殖能力。结论 HOPX通过调控Wnt/β-catenin信号通路以抑制胃癌细胞的增殖。
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