兔NF-κB p50蛋白质的原核表达及鉴定

作者：胡波; 魏后军; 范志宇; 仇汝龙; 宋艳华; 陈萌萌; 朱伟峰; 徐为中; 王芳^*

来源：江苏农业科学, 2019, 47(22): 223-225.

DOI：10.15889/j.issn.1002-1302.2019.22.052

• NF-κB
• p50蛋白
• 原核表达
• 鉴定
• 兔

为获得可溶性表达的兔NF-κB p50蛋白,本研究对兔p50基因进行大肠杆菌密码子优化及合成,并连接于原核表达载体pGEX-4T-1中,转化大肠杆菌Origami B(DE3)菌株,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,获得GST-p50融合蛋白。聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果显示,GST-p50蛋白主要以可溶形式高效表达。经谷胱甘肽S转移酶(GST)磁珠纯化及蛋白免疫印迹(western blot)鉴定,所表达的GST-p50蛋白具有良好的反应原性。研究结果为进一步开展兔NF-κB互作蛋白及信号通路的研究奠定了基础。

• 单位
  江苏省农业科学院