摘要
人血清白蛋白(HSA)上有很多的结合位点,对药物及内源性物质的运输有很重要的作用.由于HSA分子量大且结构复杂,核磁共振(NMR)谱图信号重叠严重,因此使用常规的NMR技术很难获得天然丰度HSA上结合位点的信息.我们通过新的谱编辑技术,将横向弛豫加权(T2W)与RD-Water LOGSY技术相结合(即T2W-RD-Water LOGSY),观察到了天然丰度HSA表面的一些明显的特征信号,且这些信号的分辨率较高;通过pH滴定和2D 1H-1H TOCSY实验,我们对观察到的信号做了初步指认,发现部分信号来自于HSA表面的组氨酸;然后,我们通过这些特征信号研究了金属离子与HSA之间的相互作用.结果表明该技术可用于简化天然丰度HSA的谱线,在不对HSA进行突变的情况下,能反映了Zn2+与HSA的强结合作用以及结合位点等信息.
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单位中国科学院大学; 中国科学院武汉物理与数学研究所; 波谱与原子分子物理国家重点实验室