携带BAC质粒DNA序列的重组伪狂犬病病毒变异株的构建和鉴定

作者:丛鑫; 夏水利; 向广韬; 杜明亮; 李丹丹; 刘艳; 周末; 仇华吉; 李影; 孙元
来源:中国兽医科学, 2016, (12): 1575-1581.
DOI:10.16656/j.issn.1673-4696.2016.12.016

摘要

本研究旨在以当前流行的伪狂犬病病毒变异株(TJ株)为基础,构建携带红色荧光蛋白(RFP)标记细菌人工染色体质粒的重组伪狂犬病病毒(PRV)。通过同源重组和Cre/lox P特异性位点重组的方法构建了重组病毒r PRVTJ-del TK-BAC-RFP株。PCR鉴定和测序分析结果表明,在重组病毒r PRVTJ-del TK-BAC-RFP株的基因组中已插入RFP标记的BAC质粒DNA序列;动力学参数分析表明,重组病毒的生长特性与PRV TJ株相似,尽管复制能力稍有降低,但与亲本株相比并无显著性差异;电镜检测结果显示,重组病毒与亲本病毒PRV TJ株的病毒粒子极其相似,均有囊膜,核心约为80 nm...

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