原代大鼠骨髓间充质干细胞的改良培养及鉴定

作者：马华根; 刘海琴; 唐元瑜^*

来源：中国应用生理学杂志, 2022, 38(06): 735-738.

• 骨髓间充质干细胞
• 干细胞生态位
• 改良培养
• 免疫表型
• 干细胞分化

目的:改良原代大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的分离培养方法。方法:基于“干细胞生态位”原理，采用全骨髓贴壁法结合骨片消化法分离培养原代大鼠BMSCs。通过细胞形态学观察、细胞表面标志物CD分子检测以及定向诱导分化实验对目的细胞进行鉴定。结果:所培养的细胞形态为细长梭形，其融合后呈典型的“涡旋状”紧密排列，且细胞增殖迅速，原代培养5～6 d即可达到融合状态，按1∶3比例连续传代到第8代时，细胞形态仍基本保持不变；第4代细胞的间充质干细胞表面标志物CD90、CD29、CD73以及造血干细胞表面标志物CD45、CD34、CD11b/c的阳性表达率分别为89.0%、98.3%、64.2%、3.5%、5.6%、 24.7%;定向诱导分化实验表明目的细胞具有良好的成脂、成骨分化潜能。结论:本研究基于“干细胞生态位”原理，成功建立了一种高效稳定的原代大鼠BMSCs分离培养方法。

• 单位
  北京中医药大学; 福建中医药大学