摘要
目的:对甘草进行遗传多样性分析和DNA条形码鉴别。方法:采用ISSR分子标记技术对哲里木植被区科左中旗具有代表性的6个区域的甘草遗传多样性进行分析,应用DNA条形码技术鉴定蒙药材甘草。结果:采用DNA提取试剂盒提取药材基因组DNA,通过ISSR-PCR反应共得到15张图谱,扩增条带的相对分子质量从1500到5000不等。15条引物扩增共得到80个清晰条带,其中21条表现出具有多态性,占总带数的26.3%(21/80),平均每条引物扩增的DNA谱带数为5条,多态位点百分率(PPB)为16.67%~40%。PCR扩增其核糖体DNA的内转录间隔区(internal transcribed spacer 2,ITS2),结果并进行双向分析测序,应用CodonCode Aligner17.0对获得的测序峰图进行校对拼接分析,比较ITS2序列的GC含量,采用MEGA5.0计算种内遗传距离,并得到峰图。甘草药材的ITS2序列长度为221bp,种内无变异,GC含量53.4%。结论:哲里木植被区甘草各产地样品遗传差异较小,遗传性状稳定。ITS2基因序列可以鉴定蒙药材甘草。
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单位医药学院; 内蒙古民族大学