新生小鼠耳蜗血管纹边缘细胞的原代培养及鉴定

作者：韩芳; 褚汉启; 熊浩; 王燕; 周良强; 陈金; 崔永华

来源：华中科技大学学报(医学版), 2010, 39(05): 675-678.

DOI：10.3870/j.issn.1672-0741.2010.05.021

• 血管纹
• 边缘细胞
• 原代培养
• 细胞角蛋白18 stria vascularis
• marginal cells
• primary culture
• cytokeratin 18

目的建立稳定的新生小鼠耳蜗血管纹边缘细胞的体外培养体系,为研究边缘细胞的形态和功能提供良好的条件和模型。方法用机械分离和化学消化结合的方法制成细胞悬液,将其接种于3.5 cm培养皿中贴壁生长,加入含有10%胎牛血清、氢化可的松、表皮生长因子、三碘甲状腺原氨酸、胰岛素、转铁蛋白等促进生长成分的完全培养液,于37℃、5%CO2/95%空气的恒温培养箱内培养,每日观察细胞生长状况,每周换液2次。使用细胞角蛋白18通过免疫细胞化学技术鉴定细胞的中间丝类型。制作透射电镜标本观察细胞的超微结构。结果光镜下,培养24 h至第4天可见培养皿内细胞贴壁,未见明显增长。第5天,多角形细胞开始增多。第7天,在成片的...

• 单位
  武汉市儿童医院; 华中科技大学同济医学院附属同济医院