含五种RNA病毒核酸假病毒的制备及特性研究

作者：程巧珍; 陈春; 应婷; 伍义行^*; 叶子弘; 廖学俊; 胡华军^*

来源：中国计量大学学报, 2022, 33(02): 281-287.

• 丙型肝炎病毒
• 人类免疫缺陷病毒
• 人类T细胞白血病病毒
• 假病毒
• MS2噬菌体

目的:制备一种应用于细胞制剂中丙型肝炎病毒(HCV)、人类免疫缺陷病毒1型和2型(HIV-1/2)、人类T细胞白血病病毒1型和2型(HTLV-1/2)五种RNA病毒核酸检测的阳性质控品，即装载上述五种病毒核酸的假病毒5V(5V)。方法:将上述病毒的部分基因片段连接成一条基因，与MS2噬菌体部分基因共同插入原核表达载体中构建pACYCDuet-1-MS2/5Virus重组质粒，转化到E.coli BL21(DE3)感受态中表达并鉴定；表达产物纯化浓缩，电镜分析5V形态；对5V进行DNase I、RNase A抗性及保存期的稳定性试验。结果:重组基因有效表达，5V纯度高无杂带；5V成功包装目的基因序列，具有明显的病毒结构特征；5V能抵抗高浓度的DNase I和RNase A的降解，在-20℃稳定保存6个月。结论:制备的5V稳定，达到了作为细胞制剂中RNA病毒核酸检测阳性质控品的基本要求。

• 单位
  生命科学学院; 中国计量大学