血管内皮生长因子单链抗体在大肠埃希菌中的高效表达

作者：张冀原; 陈羽; 林涵; 何晴; 徐威^*

来源：微生物学杂志, 2019, 39(02): 50-55.

• 血管内皮生长因子单链抗体
• 条件优化
• 大肠埃希菌
• 表达

以血管内皮生长因子单链抗体(pTA-anti-VEGF-scFv)为研究对象,考察不同培养基配方和培养条件对血管内皮生长因子单链抗体表达量的影响。经均匀设计试验,确定工程菌R22-4高效表达重组抗体的最佳培养基为以2×YT培养基为基础,添加质量分数为0.3%葡萄糖、1.0%酪蛋白胨、0.4%玉米浆、0.133%KH2PO4、0.159 6%K2HPO4、0.532%NaCl、0.01%微量元素、0.04%维生素B1;诱导条件为30℃、0.1 mmol/L IPTG(异丙基硫代半乳糖苷,Isopropylβ-D-Thiogalactoside)诱导5 h。经ELISA (酶联免疫吸附测定,enzyme linked immunosorbent assay)检测,血管内皮生长因子单链抗体的表达量是原始对照组的2.27倍,实现了血管内皮生长因子单链抗体在大肠埃希菌中的高效表达。

• 单位
  沈阳药科大学