益气活血通络方调控Drp1抑制血管新生减轻单侧输尿管梗阻大鼠肾纤维化

作者：张孟娟; 王洪双; 许畅; 刘佳志; 何珍; 徐贺朋; 周文平; 钟艳; 王筝; 王香婷^*

来源：中药新药与临床药理, 2023, 34(10): 1354-1362.

DOI：10.19378/j.issn.1003-9783.2023.10.004

• 益气活血通络方
• 慢性肾脏病
• 单侧输尿管梗阻
• 肾纤维化
• 血管新生
• 动力相关蛋白1
• 大鼠

目的 探讨益气活血通络方(黄芪、丹参、川芎、地龙等)调控动力相关蛋白1(Drp1)抑制血管新生，减轻单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾纤维化的作用机制。方法 将雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、氯沙坦钾组(20 mg·kg-1)、益气活血通络方组(1.92 g·kg-1颗粒剂)，每组12只。采用单侧输尿管结扎的方式复制肾纤维化大鼠模型。术后第1天开始灌胃给药，每日1次，连续14 d。采用HE、Masson染色法观察肾组织病理变化；采用免疫组化法检测肾组织中Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)、血管内皮生长因子A(VEGF-A)、 CD34的表达；Western Blot法检测肾组织中α-SMA、Vimentin、VEGF-A、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)、Drp1及Ser616位点磷酸化Drp1(p-Drp1S616)蛋白表达；Real-time PCR法检测肾组织中VEGF-A、VEGFR2、CD34 mRNA表达。结果 与假手术组比较，模型组大鼠肾组织出现明显的肾小管上皮细胞变性、坏死、脱落，大量炎性细胞浸润，肾小管萎缩，肾间质胶原纤维沉积明显增多(P<0.05)；肾间质中的ColⅠ、α-SMA、Vimentin、CD34蛋白表达量及胞质中VEGF-A蛋白表达量明显升高(P<0.05)；肾组织中α-SMA、Vimentin、VEGF-A、VEGFR2及p-Drp1/Drp1蛋白表达水平均明显升高(P<0.05),VEGF-A、VEGFR2、CD34 mRNA表达水平明显升高(P<0.05)。与模型组比较，益气活血通络方组大鼠的肾脏炎性细胞浸润有一定程度减轻，胶原纤维沉积明显减少(P<0.05)；肾间质中的ColⅠ、α-SMA、Vimentin、CD34蛋白表达量及胞质中VEGF-A蛋白表达量明显降低(P<0.05)；肾组织中α-SMA、Vimentin、VEGF-A、VEGFR2及p-Drp1/Drp1蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),VEGF-A、VEGFR2、CD34 mRNA表达水平明显降低(P<0.05)。结论 益气活血通络方能够减轻UUO大鼠肾纤维化水平，其机制可能与下调Drp1磷酸化水平、抑制血管新生有关。

• 单位
  河北中医学院