伪狂犬病毒在小鼠原代神经细胞中潜伏感染模型的建立

作者：向广韬; 吴红霞; 王异民; 周末; 王亚林; 王翌; 尹航; 仇华吉; 孙元^*

来源：中国预防兽医学报, 2023, 1-7.

• 伪狂犬病毒
• 小鼠背根神经节
• 潜伏感染
• 再激活
• 模型

由于缺少良好的潜伏感染模型，人们对PRV潜伏感染机制知之甚少。本研究旨在为研究PRV的潜伏感染建立体外细胞模型。通过分离新生鼠背根神经节（DRG）获取神经细胞，并用间接免疫荧光（IFA）的方法对其进行鉴定，获得了DRG中的神经细胞。用报告重组病毒（rPRV-EGFP）感染此神经细胞，同时添加阿昔洛韦（ACV）抑制病毒复制以建立潜伏感染。并对影响潜伏感染的条件，病毒接种剂量和ACV的浓度进行优化。结果显示，感染复数（MOI）为0.001,ACV浓度为0.5 mmol/L，病毒能够在神经细胞上稳定地建立潜伏感染。用荧光定量RT-PCR、测定病毒滴度、药物刺激再激活的方法对潜伏感染进行了鉴定。结果显示，潜伏感染时病毒不能复制，且不产生感染性病毒粒子；而经LY294002(PI3K抑制剂)诱导病毒再激活后，病毒大量复制并产生感染性病毒粒子。本研究利用小鼠原代神经细胞建立了PRV的潜伏感染模型，该模型的建立为PRV潜伏感染机制的研究奠定了基础。

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室