结核分枝杆菌rBCG-Rv2029c重组疫苗的构建与鉴定

作者：薛士鹏; 吴建勇; 宋彬; 齐红双; 李英; 党颍徐; 满永宏

来源：中国人兽共患病学报, 2017, 33(08): 744-752.

• 卡介苗
• 重组疫苗
• 结核杆菌
• Rv2029c

目的构建结核分枝杆菌rBCG-Rv2029c重组疫苗并鉴定。方法通过PCR扩增Rv2029c抗原编码基因,然后用双酶切法将Rv2029c和pMV261质粒酶切,再将酶切产物连接成rpMV261-2029c重组质粒,用电穿孔法将该质粒导入BCG中构建成rBCG-Rv2029c重组疫苗,最后用SDS-PAGE和Western blotting鉴定表达的重组蛋白。结果通过PCR成功扩增出1 020bp的Rv2029c基因,插入到pMV261质粒中,再把融合基因成功导入BCG中,经双酶切及基因比对鉴定证实,再通过热诱导后用Western blotting显示重组蛋白具有免疫原性。结论成功构建了结核分枝杆菌rBCG-Rv2029c重组活疫苗,为重组疫苗的免疫机制研究奠定基础。

• 单位
  南阳医学高等专科学校; 河南大学; 南阳南石医院