利用戊型肝炎病毒开放读码框架2截短多肽降低抗戊型肝炎病毒IgM检测中的假阳性

作者：毕永春; 潘金顺; 庄辉; 孙静; 吴超; 唐勤; 周乙华

来源：中华检验医学杂志, 2009, (07): 821-824.

• 肝炎病毒,戊型
• 免疫球蛋白M
• 病毒蛋白质类
• 酶联免疫吸附测定
• 假阳性反应

目的研究用戊型肝炎病毒4型(HEV-4)开放读码框架(ORF)2主要免疫表位截短多肽排除抗-HEV IgM检测中发生假阳性的可行性。方法用重组HEV4 ORF2蛋白主要抗原决定簇多肽(459-607位氨基酸)及其截短多肽(472～607位氨基酸)为抗原分别包被ELfSA板,用间接ELISA法分别检测35份HEV RNA阳性患者血清、69份健康人血清和117份可疑阳性血清标本的抗-HEV IgM,并用免疫印迹法(Western blot,WB)确认,逆转录(RT)-PCR检测HEV RNA加以比较。结果 WB检测结果显示,戊型病毒性肝炎患者血清中抗-HEV IgM仅与459～607多肽二聚体反应,而不与其单体及472～607多肽反应。间接ELISA法检测35份HEV RNA阳性患者血清抗-HEV IgM均能与459～607多肽反应,而不与472～607多肽反应;69名健康人血清与2种多肽都不反应。117份可疑阳性血清中,5份能同时与2种多肽反应,但450 nm吸光度(A450)值之差小于0.5。WB检测这5份血清抗-HEV IgM均阴性;RT-PCR检测HEV RNA为阴性,说明这5份血清为非特异性吸附引起的假阳性。结论 ORF2 459～607多肽可有效检测抗-HEV IgM,根据血清与2种多肽反应的A450差异,能有效排除因非特异性吸附导致的抗-HEV IgM假阳性。

• 单位
  北京大学; 南京大学医学院附属鼓楼医院