龋齿致病菌变形链球菌蛋白Smu.260的制备、结晶及初级晶体学分析

作者：张晓嫣; 米伟; 周艳峰; 刘翔宇; 李兰芬; 梁宇和; 魏世成; 苏晓东

来源：生物化学与生物物理进展, 2005, 32(3): 217-220.

DOI：10.3321/j.issn:1000-3282.2005.03.005

• 变形链球菌
• 龋齿
• Smu.260
• 蛋白质晶体学

变形链球菌(Streptococcus mutans)是最主要的龋齿致病菌,其基因Smu.260编码一个约23 ku(200个氨基酸)的蛋白质.Smu.260的DNA片段被克隆到表达载体pET28a后在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中表达得到很好的产量.产物smu.260蛋白通过Ni2+亲和柱和分子筛两步法纯化,并发现纯化后的蛋白以两种形式存在,二聚体(约46 ku)和四聚体,前者呈亮黄色,后者无色.采用悬滴气象扩散法得到了二聚体形式的晶体.晶体的x射线衍射分辨率达到23 A,晶体属正交空间群P212121,晶格参数为a=89.88 A,6=90.91 A,c=105.17 A.晶胞不对称单元内估计含有一个二聚体,溶剂含量为53%.

• 单位
  生命科学学院; 北京大学